Ehrlich苏木素染色液说明书

【保存条件】

室温，避光保存，两年有效。

【产品概述】

苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE染色，是病理学和组织学最常用的一种染色方法。苏木精为碱性天然染料，可使细胞核着色。细胞核内染色质的主要成分是DNA，在DNA的双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使DNA双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易与不带正电荷的苏木精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素成熟的方法有自然氧化法、化学氧化法。自然氧化是指暴露于光和空气中，这个过程比较缓慢，约需3～6个月不等，但生成物染色能力可维持很长时间。Ehrlich和Delafield苏木素就属于这种。

Ehrlich苏木素作为一种良好的核染色液，也可用于黏蛋白染色如软骨的黏液多糖，骨和软骨的染色也推荐使用Ehrlich苏木素染液。Ehrlich苏木素染液非常稳定，成熟后密封可保存2年。对核染色质染得很清晰细致，染色时间也稍长，约15～20min。适用于教学和科研上的制片染色，用此染色液对冷冻切片染色则不理想。

【操作步骤】（仅供参考）

(一)石蜡切片染色

1、切片脱蜡至水

（1）二甲苯作用2次，每次5～10min。

（2）(可选)无水乙醇作用2次，每次3～5min。

（3）95%的乙醇 3～5min。

（4）90%的乙醇 3～5min。

（5）80%的乙醇 3～5min。

（6）自来水或蒸馏水冲洗 1～3min。

2、染色

（1）Ehrlich苏木素染色液染色 15～20min。

（2）自来水或蒸馏水冲洗 5～10s。

（3）(可选)盐酸乙醇分化 2～5s。

（4）自来水冲洗 20～30s。

（5）(可选)蓝化液返蓝 20～40s。

（6）自来水冲洗 30～60s。

（7）伊红染色液染色 3～5min。

（8）自来水冲洗 1～5s。

3、脱水、透明、封固

（1）80%乙醇 10～20s。

（2）90%乙醇 10～20s。

（3）95%乙醇作用2次，每次1～2min。

（4）无水乙醇作用2次，每次2～3min。

（5）二甲苯透明3次，每次2～3min。

（6）中性树脂封片。

染色结果：细胞核呈蓝色；细胞质、肌纤维、胶原纤维等呈深浅不一的红色；角蛋白、红细胞等呈明亮的橙红色。

(二)细胞染色

1、4%多聚甲醛固定 10～20min。

2、自来水冲洗 2 次，每次 2min。

3、蒸馏水冲洗 2 次，每次 2min。

4、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤，作用时间应相应缩短。

染色结果：细胞核呈蓝色；细胞质、纤维呈红色。

【注意事项】

1、切片脱蜡应尽量干净。系列乙醇应经常更换新液。

2、盐酸乙醇分化时间应根据切片厚薄、组织类别以及新旧而定，另外分化后自来水冲洗时间应该足够，以便彻底清洗酸。

3、蓝化液常使用0.2～1%氨水或Scott促蓝液或0.1～1%碳酸锂溶液。

4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。