【货号】 BP-DL501

【规格】 100mL

【保存】 2~8℃，避光，12个月有效。

【产品组成】

  

【产品简介】

伊文思蓝（Evans Blue）又称偶氮蓝，分子式C₃₄H₂₄N₆Na₄O₁₄S₄，分子量为960.80，CAS号为314-13-6。伊文思蓝与台盼蓝都是细胞活性染料，常用于检测细胞膜的完整性和细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色，而死细胞会被染成淡蓝色。活细胞因有外排功能而无法被伊文思蓝染色，因此可以通过此方法在显微镜下区分死细胞与活细胞，但无法区分死亡与坏死。

【使用方法】 

（一）血脑屏障通透性 

1. 取处理后的实验动物（以小鼠为例），静脉注射伊文思蓝染色液（0.5%），小鼠眼睛. 皮肤出现蓝色。0.5~1h后处死小鼠，取目的脑组织。

2. 脑组织置于1.5ml离心管中，加入1mlPBS，迅速用组织匀浆器将脑组织制成匀浆，离心。

3. 取上清，加入等量三氯乙酸，4℃孵育。该步骤亦可采用如下操作: 取上清，按上清:丙酮=3:7比例加入丙酮，室温孵育24h。

4. 离心15min。 

5. 取上述溶液，用分光光度计测620nm处吸光值（OD值）。同时测定已知不同梯度的标准依文思蓝的OD值，绘制标准曲线。根据标准曲线计算出待测待测样品的依文思蓝含量。

（二）活细胞染色 

1. 取100μl重悬细胞到常规离心管内，入100μl 伊文思蓝染色液（0.5%）轻轻混匀染色（染色时间可适当延长，但不宜超过10min）。 

2. 吸取少量经过染色后的细胞，用血细胞计数板计数。通常如果要比较精确地进行定量，每个细胞样品至少数500个细胞，数出蓝色细胞和细胞总数。

细胞存活率计算公式如下: 细胞存活率＝(细胞总数－蓝色细胞数)/细胞总数×100% 

【染色结果】

  

【注意事项】

1. 伊文思蓝染色液（0.5%）对人体有轻微毒性，请小心防护。 

2. 细胞染色时，注意凋亡小体偶尔也有拒染现象。

3. 血脑屏障通透性实验中，伊文思蓝染色液（0.5%）注射量应根据不同动物以及动物的重量调整。

4. 最好采用低温冷冻离心机进行离心。

5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。