1、1个96T试剂盒能测多少个样？

2、标准品500ml（96T/48T），能够测多少次？

1）单标可以测四次

2）双标可以测两次

3、血液样本如何选择测ELISA？

1、血浆全血标本经抗凝分离后去除血细胞成分即为血浆，主要化学成分测定和凝血项目检测等。

2、血清是血液离休凝固后分离出来的液体，血清与血浆相比较，主要是缺乏纤维蛋白原，某些凝血因子也发生了变化。血清主要用于化学和免疫学等检测。

说明书上一般写血浆和血清都可以检测，根据需要选择，例如：纤维蛋白原检测用血浆样本，血清样本检测纤维蛋白原残留。

来源：刘成玉. 临床检验基础[M]. 2005.P5

4、血液样本发生溶血是否能检测？

轻微溶血勉强可以检测，明显溶血建议重新取样，溶血因红细胞破坏溶解时释放大量具有过氧化物酶活性的血红蛋白，在以辣根过氧化物酶为标记的ELISA，会导致非特异性显色，干扰测定结果。

来源：

http://www.360doc.com/content/18/1207/05/52645714_799883575.shtml

5、组织样本操作流程：

1） 组织样本必须保持鲜重，如果是冻存的组织，应该室温平行2小时以上，然后用生理盐水冲洗干净，再用滤纸把周围的水分吸干，称重！组织重量不能低于50mg；

2）组织匀浆液选取是PBS（PH=7.2-7.4，浓度为0.01mol/L）匀浆的比例为1:10，相当于1g组织加9ml的匀浆液；

3）组织匀浆后，离心取上清，离心转数为5000转，但不能超过5000转，时间为15分钟；

4） 实验中样本提取的是200mg的样本加1.8ml的匀浆液。

6、组织样本操作中的常见问题：

1）问：从各样品中取了同样大小的肉块吧？具体是取了多少？怎么取的？称重方式吗？之前好像提到过肉块大小的尺寸，是不是用其他方式做到了各样品的起始量的一致？

答：对于组织，不可能确定好每块组织都达到恒定的重量，这个不太现实。都是按照固定的匀浆比例（匀浆比例为10%），相当于1g组织加9ml的匀浆液，重量小的，匀浆液也会少。最终的浓度是不变的！

2）问：测定样品时需要将样品制成液体样本吧？请问是如何做成液体样品的？匀浆吗？如果是匀浆方式的话应该有溶剂的，使用了哪些溶剂呢？

答：匀浆比例在上面已经告诉了，匀浆液采用的是0.01mol的PBS（磷酸盐缓冲液）PH控制在7.2-7.4。

7、ELISA试剂盒操作细节常见问题整理：

1）问：是不是空白对照就是什么都不加？

答：不加样本，不加样本稀释液，不加酶标试剂，其他都可以加。

2）问：样本稀释液是配好的吗？

答：样本稀释液是配好的。

3）问：样本稀释液可以用来直接稀释血清吗？

答：可以的，直接加40ul就可以了。

4）问：洗涤液是浓缩的；是一次配好，还是现配现用？谢谢。

答：浓缩的，现配现用。

5）问：加入的显色液A\B分别是什么物质？作用原理？

答：显色剂A和B，是经典的TMB显色系统。具体原理可以参考免疫方面的教科书。在这里不详细列出。

6）问：终止液是什么物质？如何做到终止反应的？

答：终止液是2mol的硫酸溶剂。终止反应也是和原理相关。这个参考教科书！

7）问：稀释液是什么成分？

答：标准稀释液是PBS（PH=7.2-7.4，浓度是0.01mol/L）。样本稀释液是含有0.5%BSA的PBS（PH=7.2-7.4，浓度是0.01mol/L）。

8）问：需要避光保存的试剂是哪个？

答：需要避光的是显色液B。

9）问：试剂盒从冰箱取出后，室温放置会影响其效果吗？

答：试剂盒在做实验前应该要室温平衡一小时。短时间（3、4小时）没有任何影响。

10）问：样品研磨后是立即离心，还是在4度冰箱里提取几个小时以后再离心？

答：样本研磨后立即离心即可。

补充：5%BSA 封闭液(Blocking Buffer)适用于 Western Blotting、ELISA 以及免疫组化实验中非特异性蛋白结合位点的封闭。

8、样本保存条件和时间怎么选择？

9、最后如果样本数据没有达到预期效果，不要慌，可以按下面流程排查问题，或者联系公司技术。